缓激肽是一种含有9种氨基酸的生理和药理活性肽，由蛋白质的激肽基团衍生而来。激肽是可以促使血管舒张、血管通透性增强、一氧化氮释放和花生四烯酸流动的效应因子。它是血压、肾功能和心脏功能的重要调节因子，还参与炎症反应。缓激肽可引起血管扩张，从而导致血压降低。

因此，对这种激素肽的变化进行高灵敏度、高选择性和高准确度地定量，并将其作为疾病进展或药物治疗的评估指标，将会极为有利。尽管以往都是通过配体结合试验(LBAs)对生物制剂进行定量分析但在过去几年中利用LC-MS/MS分析大分子已成为一种趋势。这在某种程度上是因为LBAs产生显著的交叉反应问题并且缺乏标准化。

LC-MS/MS具有多种优势，例如开发时间更短、准确度和精度更高、可重复进样，并且容易区分相似度很高的类似物、代谢物或内源性干扰物。常见的肽通常难以通过LC-MS/MS进行分析这是因为其不易离子化以及不易产生理想的碎片离子而导致MS灵敏度较低，从而使得LC和样品制备方法开发非常困难。由于缓激肽在血浆中的浓度低至pg/mL水平且代谢速度快，在采血和样品制备过程中还可通过蛋白水解人为生成，因此对其进行准确定量相当困难。

本研究采用了专门设计的血液收集技术以防止体外缓激肽的形成，并且利用混合型固相萃取SPE)和高效实心核颗粒色谱柱，最大限度降低并消除基质干扰的同时提高定量分析的灵敏度。

应用优势

■ 使用CORT ECS™ UPLC^®

■ 采用Oasis^®WCX(一种混合型吸附剂)的SPE方法降低了基质干扰并提高了血浆中缓激肽提取的选择性

■ Oasis μElution96孔板可浓缩样品，并在最大程度上减少肽损失，使血浆中缓激肽的检测限达到5 pg/mL

■ 选择性高的快速SPE提取(<30 分钟)省去了耗时的免疫亲和纯化步骤

■ Xevosup>®TQ-S MS可实现与免疫检测方法相匹配的高灵敏度，但与后者相比更加省时省力

■ 与传统LBA方法相比更为准确精密

■ 分析速度快，只需3.5分钟，大大提高了工作效率

沃特世解决方案

ACQUITY UPLC^®系统

Xevo TQ-S质谱仪

CORTECS UPLC C18色谱柱

Oasis WCX 96孔µElution提取板

ACQUITY^®96孔收集板